ข้อมูลเบื้องต้นเกี่ยวกับวิธีป้องกัน-การเก็บรักษาไวรัสไครโอเจนิก
Apr 15, 2019
จุลินทรีย์จำนวนมากจำเป็นต้องได้รับการเก็บรักษาไว้ที่อุณหภูมิต่ำ ดังนั้นวิธีเก็บรักษาที่อุณหภูมิต่ำเป็นพิเศษ-จึงเป็นวิธีเก็บรักษาจุลินทรีย์ที่หลากหลาย ไมโครไบโอมที่ต้องการสารอาหารที่ซับซ้อน เช่น ที่ไม่สามารถคงสภาพไว้ได้ด้วยวิธีการจัดเก็บอื่นๆ (เช่น เชื้อราที่ทำให้เกิดโรคพืช) มักจะถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำมากเป็นพิเศษ- (ATCC1983; Halliday, Baker 1985)
วิธีการนี้คือการแช่แข็งเซลล์ในหลอดหรือหลอดเล็ก ๆ ด้วยอัตราการแช่แข็งที่ช้าลง (1 c/min) จนถึง -150 องศา C จากนั้นเก็บหลอดเล็กเหล่านี้ในไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิ -150 ถึง 196 องศา C สารป้องกันการแช่แข็งที่อุณหภูมิต่ำพิเศษแตกต่างจากที่ใช้ในการทำแห้งแบบเยือกแข็ง โดยปกติ ATCC จะใช้ส่วนผสมที่ทำจากกลีเซอรีน (10%) เมตฟอร์มิน (5%) และของเหลวเพาะเลี้ยงเพื่อรักษาเส้นเซลล์ส่วนใหญ่ สารเคมีเหล่านี้เข้าสู่เซลล์เพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายที่เยือกแข็งต่อเยื่อบุ เซลล์ที่เก็บไว้ในภาชนะแช่แข็งจะต้องได้รับการดูแลด้วยความระมัดระวังเมื่อทำการช่วยชีวิต เมื่อหลอดได้รับความร้อน ผลึกน้ำแข็งที่เกิดขึ้นจะฆ่าเซลล์และสามารถหลีกเลี่ยงอุบัติเหตุได้โดยการทำงานที่เหมาะสม
ตราบใดที่ตัวอย่างถูกละลายอย่างรวดเร็วเพื่อลดการสูญเสียพลังชีวิต วิธีปฏิบัติก็คือ: ใส่ท่อขนาดเล็กที่ปิดสนิทลงในน้ำที่มีอุณหภูมิ 37 องศา C อย่างรวดเร็ว จนกระทั่งน้ำแข็งละลายทั้งหมด จากนั้นจึงเปิดหลอดที่เนื้อหาอยู่ในตัวกลาง จุลินทรีย์ที่ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิต่ำเป็นพิเศษ-จะต้องถูกเก็บไว้ในสภาพแวดล้อมที่มีอุณหภูมิต่ำมากเสมอ ดังนั้นจึงจำเป็นต้องใช้ถังไนโตรเจนเหลว ควรให้ความสนใจเป็นประจำต่อการนำไนโตรเจนเหลวกลับมาในระหว่างการเก็บรักษาระยะยาว- การจัดเก็บประเภทนี้ต้องใช้เงินทุนมากกว่าการแช่เยือกแข็ง- ซึ่งรวมถึงแรงงานและไนโตรเจนเหลว ซึ่งจำเป็นต่อการรักษาอุณหภูมิในการจัดเก็บ

