วิธีการตรวจจับการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันของสัตว์
May 20, 2019
วิธีการทดสอบในหลอดทดลองสำหรับผมปลาย-ปฏิกิริยาการแพ้ของเส้นผม การทดสอบผิวหนังและการกระตุ้นให้เกิดการแพ้จากการสัมผัสเป็นสองวิธีทั่วไปในการตรวจหาผมปลาย-ที่กระตุ้นให้เกิดปฏิกิริยาภูมิแพ้ (DTH)
ในการทดสอบผิวหนัง -การตอบสนองต่อแอนติเจนที่ทำให้ผู้ป่วยไวต่อความรู้สึกเกิดขึ้นอีกครั้ง และการแพ้จากการสัมผัสคือความสามารถในการทดสอบความสามารถของผู้รับต่อความไวต่อสารที่ไม่เคยสัมผัส. 1. การทดสอบผิวหนังด้วยการทดสอบผิวหนัง การวินิจฉัย DTH แอนติเจนที่ใช้กันทั่วไปมีอนุพันธ์ของโปรตีนบริสุทธิ์ของแบคทีเรีย TB (PPD) ไวรัสคางทูม แคนดิเดอิน ฯลฯ ในการทดสอบของมนุษย์ในการฉีดผิวหนังบริเวณปลายแขนของแอนติเจนที่ละลายน้ำได้จำนวนเล็กน้อย 24 ถึง 48 เล็ก วัดขนาดของปมแข็งสีแดงและบวม เส้นผ่านศูนย์กลางปมแข็งมากกว่า 10 มม. ถือว่าเป็นบวก มันแสดงให้เห็นว่าผู้ถูกทดสอบมีภูมิคุ้มกันระดับเซลล์ต่อเชื้อโรคในระดับหนึ่ง หากการทดสอบทางผิวหนังไม่ตอบสนอง สามารถใช้การทดสอบแอนติเจนที่มีความเข้มข้นสูงกว่าซ้ำได้ หากยังไม่มีการตอบสนองที่เป็นลบ ก็จำเป็นต้องยกเว้นข้อผิดพลาดทางเทคนิคในการทดสอบผิวหนัง อาจเป็นได้ว่าผู้ถูกทดสอบไม่เคยสัมผัสกับแอนติเจนนี้ อาจเกิดจากการขาดการทำงานของภูมิคุ้มกันของเซลล์ หรือเนื่องจากการทำงานของภูมิคุ้มกันของเซลล์บกพร่อง
หรือไม่-เกิดปฏิกิริยาเนื่องจากการติดเชื้อรุนแรง (โรคหัด วัณโรคแพร่กระจายเรื้อรัง). 2. การแพ้จากการสัมผัสมักจะใช้สารประกอบที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำ เช่น ไดนิทรอล คลอโรเบนซีน (DNCB) ที่ชักนำให้เกิดการแพ้จากการสัมผัส สารประกอบจับกับโปรตีนของผิวหนังเพื่อกระตุ้นปฏิกิริยา DTH ในการทดสอบกับสัตว์ ผิวหนังจะปรากฏเป็นบวกหากผิวหนังปรากฏเป็นบวกหลังจากการกระตุ้น 7 ถึง 10 วัน หลังจากครั้งแรกที่ใช้ DNCB กับผิวหนัง
การทดลองนี้ไม่ได้ใช้โดยมนุษย์อีกต่อไป
วิธีการตรวจหาภูมิคุ้มกันของเซลล์ในหลอดทดลอง การตรวจหาจำนวนและการทำงานของลิมโฟไซต์ในหลอดทดลองนั้นง่ายกว่าในการรวบรวมตัวอย่างเลือด อันดับแรกจำเป็นต้องแยกหรือทำให้ลิมโฟไซต์บริสุทธิ์ โดยทั่วไปใช้กลูตาไลสัน-กลูตามีนแพนโฟโตนิกที่มีสัดส่วนของของเหลวการแบ่งชั้นของลิมโฟไซต์ 1.077 เมื่อเลือดทับซ้อนด้านบนของลิมโฟไซต์ การหมุนเหวี่ยงของเหลวแบบแบ่งชั้นเนื่องจากเซลล์เม็ดเลือดแดง (1.092) เซลล์เม็ดเลือดขาวนิวเคลียร์ polymorphic (หลัก 1.090) สัดส่วนของเซลล์เม็ดเลือดขาว (1.070) จะแตกต่างกันและแยกออกจากกัน ลิมโฟไซต์และโมโนไซต์ก่อตัวเป็นชั้นบาง ๆ ที่จุดเชื่อมต่อของพลาสมาและการแบ่งชั้น
แบ่งชั้นเซลล์บางๆ นี้อย่างระมัดระวัง โดยเซลล์เม็ดเลือดขาวคิดเป็น 80%, โมโนนิวคลีโอซิสคิดเป็น 20%, เซลล์เม็ดเลือดขาวคิดเป็น 80%, เซลล์ B คิดเป็น 4% ถึง 10%, เป็นเซลล์ที่ไม่ใช่-DT, ไม่ใช่-เซลล์ B ⑴ พวงมาลัย E-: พื้นผิวทีเซลล์ของมนุษย์มีตัวรับ SRBC (CD2) สามารถจับกับ SRBC เพื่อสร้างโครงสร้างคล้ายวงแหวนกุหลาบ- สารแขวนลอย RBM และ SRBC ที่แยกได้โดยของเหลวหลายชั้นผสมในน้ำเกลือที่สมดุลซึ่งมีซีรั่ม เพาะเลี้ยงที่อุณหภูมิ 37 องศา C 5 ถึง 10 นาที ใส่อุณหภูมิ 4 องศา C ข้ามคืน นับจำนวนเซลล์แขวนลอย เซลล์เม็ดเลือดขาวในเลือดประมาณ 70% ถึง 80% ของ ลิมโฟไซต์สร้างพวงมาลาหรือทีเซลล์
ปัจจุบันวิธีนี้ได้ถูกนำมาใช้เพื่อแยกทีเซลล์โดยไม่ต้องทำการนับที- (2) การนับทีเซลล์ด้วยโมโนโคลนอลแอนติบอดี: PBM ของมนุษย์แบ่งออกเป็นสามส่วนเท่าๆ กัน พรี-แอนติบอดีของหนูที่ต่อต้าน-CD3, CD4 และ CD8 ของมนุษย์จะถูกรวมเข้ากับเซลล์ จากนั้นแอนติบอดีตัวที่สองของ IgG ของหนูที่ต่อต้าน-ของกระต่ายที่มีป้ายกำกับโดย FITC จะถูกนำมาใช้สำหรับการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ทางอ้อม ในผลลัพธ์ของกล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์หรือผลการทดสอบโฟลว์ไซโตมิเตอร์ แอนติบอดี PBM cd3 ย้อมเซลล์เรืองแสงที่เรียกว่าเซลล์ CD3-plus หรือเซลล์ T ทั้งหมด คนปกติในเซลล์ PBM T คิดเป็น 70% ถึง 80% ผลรวมของเซลล์ CD4-plus และเซลล์ CD8 ในคนปกติควรสอดคล้องกับจำนวนเซลล์ CD3 อัตราส่วนของเซลล์ CD4-plus ต่อเซลล์ CD8 อยู่ที่ประมาณ 2/1 สำหรับคนปกติ ในขณะที่อัตราส่วนของผู้ป่วยโรคเอดส์น้อยกว่า 1.7

